Dihydropyrimidine dehydrogenase (DPD)

Aandoening

DPD deficiëntie.

Omschrijving

DPD katalyseert de eerste stap in de afbraakroute van pyrimidines. Een deficiëntie is geassocieerd met neurologische afwijkingen en ernstige 5FU toxiciteit.

OMIM

274270

    Methode

    HPLC-Radiochemie

    Materialen:


    EDTA volbloed

    • Onderzoeksmateriaal: Perifere bloed mononucleaire cellen geïsoleerd uit volbloed.
    • Bewaren/verzenden: kamertemperatuur.
    • Instructie: 15 ml EDTA volbloed verstuurd op kamertemperatuur. Buisjes moeten eenduidig gelabeld zijn met naam van de patiënt en geboortedatum, goed gesloten en in beschermend materiaal verstuurd worden. Het materiaal moet binnen 24 uur na afname op het laboratorium Genetische Metabole Ziekten aanwezig zijn. Een volledig ingevuld aanvraagformulier moet worden meegestuurd met het patiëntenmateriaal.
    • Doorlooptijd: 3 weken.

    Gekweekte huidfibroblasten

    • Bewaren/verzenden: kamertemperatuur.
    • Instructie: laat de fibroblasten groeien tot ~80% confluentie in een T-25 kweekfles. Vul voor versturing het kweekflesje volledig met steriel gebufferd (m.b.v. 25 mM Hepes) kweekmedium (bv. HAM of DMEM) aangevuld met 10% serum en 1% penicilline-streptomycine. Sluit het kweekflesje goed en omwikkel de dop met parafilm. Label de kweekfles eenduidig met naam van de patiënt en geboortedatum. Verpak het flesje in beschermend materiaal en verstuur de fibroblasten bij kamertemperatuur. Het materiaal moet binnen 48 uur aankomen op het laboratorium Genetische Metabole Ziekten. Een volledig ingevuld aanvraagformulier moet worden meegestuurd met het patiëntenmateriaal.
      Wanneer het niet mogelijk is fibroblasten in kweek te versturen, kan een huidbiopt in steriel gebuffered (m.b.v. 25 mM Hepes) kweekmedium (bv. HAM of DMEM) zonder toevoeging van serum of antibiotica worden verstuurd bij kamertemperatuur.
      Voor interne aanvragers:
      Bioptmedium kan worden afgehaald bij de balie van het laboratorium Genetische Metabole Ziekten (F0-132).
    • Doorlooptijd: 3 maanden.

    Lever

    • Onderzoeksmateriaal: Leverbiopt.
    • Bewaren/verzenden: droogijs.
    • Instructie: Leverbiopten (> 50 mg natgewicht) moeten na afname onmiddellijk in vloeibare stikstof worden ingevroren en bewaard worden bij -80 °C. Buisjes moeten eenduidig gelabeld zijn met naam van de patiënt en geboortedatum, goed gesloten en in beschermend materiaal, op droogijs per koerier verstuurd te worden. Zorg voor voldoende droogijs om het materiaal bevroren op ons laboratorium te laten arriveren. Let op, geen fixeermiddelen of andere vloeistoffen toevoegen! Een ingevuld aanvraagformulier met de aangevraagde enzymanalyse dient te worden meegestuurd.
    • Doorlooptijd: 3 weken.