Mitochondriale vetzuuroxidatiedefecten
Standaard initiële screening Mitochondriale vetzuuroxidatiedefecten
Screening mitochondriale β-oxidatie
Een palmitaatbelastingtest (acylcarnitine profilering) wordt uitgevoerd om te onderzoeken of een patiënt lijdt aan een defect in de mitochondriale vetzuuroxidatie. Elk mitochondriaal vetzuuroxidatiedefect geeft een specifiek acylcarnitineprofiel. Vervolgens moet de enzym deficiëntie bevestigd worden door middel van een enzymactiviteitsbepaling of in het geval van een mogelijke multipele acyl-CoA dehydrogenase deficiëntie (MADD, glutaaracidurie type 2) door middel van moleculaire analyse. Sommige milde deficiënties kunnen een normaal acylcarnitineprofiel geven. De palmitaatbelastingtest kan ook worden uitgevoerd om het effect van mutaties in het gen coderend voor één van de mitochondriale β-oxidatie enzymen op de flux door het mitochondriale β-oxidatiesysteem te bestuderen.
Materiaal:
Gekweekte huidfibroblasten
- Bewaren/verzenden: Kamertemperatuur.
- Instructie: Laat de fibroblasten groeien tot ~80% confluentie in een T-25 kweekfles. Vul voor versturing het kweekflesje volledig met steriel gebufferd (m.b.v. 25 mM Hepes) kweekmedium (bv. HAM of DMEM) aangevuld met 10% serum en 1% penicilline-streptomycine. Sluit het kweekflesje goed en omwikkel de dop met parafilm. Label de kweekfles eenduidig met naam van de patiënt en geboortedatum. Verpak het flesje in beschermend materiaal en verstuur de fibroblasten bij kamertemperatuur. Het materiaal moet binnen 48 uur aankomen op het laboratorium Genetische Metabole Ziekten. Een volledig ingevuld aanvraagformulier moet worden meegestuurd met het patiëntenmateriaal.
Wanneer het niet mogelijk is fibroblasten in kweek te versturen, kan een huidbiopt in steriel gebuffered (m.b.v. 25 mM Hepes) kweekmedium (bv. HAM of DMEM) zonder toevoeging van serum of antibiotica worden verstuurd bij kamertemperatuur.
Voor interne aanvragers:
Bioptmedium kan worden afgehaald bij de balie van het laboratorium Genetische Metabole Ziekten (F0-132). - Doorlooptijd: 3 maanden.
Carnitine/acylcarnitine transporter (CACT)
Aandoening
CACT deficiëntie.
Omschrijving
Carnitine/acylcarnitine transporter (CACT) katalyseert de import van acylcarnitines gevormd door CPT1 het mitochondrion in waarbij vrij carnitine wordt uitgewisseld. CACT-activiteit wordt gemeten met behulp van gelabeld acetyl-carnitine in gekweekte huidfibroblasten.
OMIM
Methode
Radiochemie.
Materialen:
Gekweekte huidfibroblasten
- Bewaren/verzenden: Kamertemperatuur.
- Instructie: Laat de fibroblasten groeien tot ~80% confluentie in een T-25 kweekfles. Vul voor versturing het kweekflesje volledig met steriel gebufferd (m.b.v. 25 mM Hepes) kweekmedium (bv. HAM of DMEM) aangevuld met 10% serum en 1% penicilline-streptomycine. Sluit het kweekflesje goed en omwikkel de dop met parafilm. Label de kweekfles eenduidig met naam van de patiënt en geboortedatum. Verpak het flesje in beschermend materiaal en verstuur de fibroblasten bij kamertemperatuur. Het materiaal moet binnen 48 uur aankomen op het laboratorium Genetische Metabole Ziekten. Een volledig ingevuld aanvraagformulier moet worden meegestuurd met het patiëntenmateriaal.
Wanneer het niet mogelijk is fibroblasten in kweek te versturen, kan een huidbiopt in steriel gebuffered (m.b.v. 25 mM Hepes) kweekmedium (bv. HAM of DMEM) zonder toevoeging van serum of antibiotica worden verstuurd bij kamertemperatuur.
Voor interne aanvragers:
Bioptmedium kan worden afgehaald bij de balie van het laboratorium Genetische Metabole Ziekten (F0-132). - Doorlooptijd: 3 maanden.
Carnitine palmitoyltransferase 1 (CPT1)
Aandoening
CPT1 deficiëntie.
Omschrijving
Carnitine palmitoyltransferase 1 (CPT1) katalyseert de vorming van acylcarnitines uit acyl-CoAs en is de eerste en snelheidsbepalende stap in de mitochondriale oxidatie van lang-keten vetzuren. CPT1 activiteit wordt gemeten met gelabeld palmitoyl-CoA in gekweekte huidfibroblasten.
OMIM
Methode
MS/MS
Materialen:
Gekweekte huidfibroblasten
- Bewaren/verzenden: Kamertemperatuur.
- Instructie: Laat de fibroblasten groeien tot ~80% confluentie in een T-25 kweekfles. Vul voor versturing het kweekflesje volledig met steriel gebufferd (25 mM Hepes) kweekmedium aangevuld met 10% serum en 1% penicilline-streptomycine. Sluit het kweekflesje goed en omwikkel de dop met parafilm. Label de kweekfles eenduidig met naam van de patiënt en datum van afname. Verpak het flesje in beschermend materiaal en verstuur de fibroblasten bij kamertemperatuur. Het materiaal moet binnen 48 uur aankomen op het laboratorium Genetische Metabole Ziekten. Een volledig ingevuld aanvraagformulier moet worden meegestuurd met het patiëntenmateriaal.
Wanneer het niet mogelijk is fibroblasten in kweek te versturen, kan een huidbiopt in steriel gebuffered (25 mM Hepes) kweekmedium zonder toevoeging van serum of antibiotica worden verstuurd bij kamertemperatuur.
Voor interne aanvragers:
Bioptmedium kan worden afgehaald bij de balie van het Laboratorium Genetische Metabole Ziekten (F0-132). - Doorlooptijd: 3 maanden.
Carnitine palmitoyltransferase 2 (CPT2)
Aandoening
CPT2 deficiëntie.
Omschrijving
Carnitine palmitoyltransferase 2 (CPT2) katalyseert de vorming van acyl-CoAs uit acylcarnitines, na transport het mitochondrion in, voor ze geoxideerd kunnen worden.
OMIM
Methode
UPLC-UV
Materialen:
EDTA volbloed
- Onderzoeksmateriaal: Perifere bloed mononucleaire cellen geïsoleerd uit volbloed.
- Bewaren/verzenden: Kamertemperatuur.
- Instructie: Ten minste 4.5 ml EDTA volbloed verstuurd op kamertemperatuur. Buisjes moeten eenduidig gelabeld zijn met naam van de patiënt en geboortedatum, goed gesloten en in beschermend materiaal verstuurd worden. Het materiaal moet binnen 24 uur na afname op het laboratorium Genetische Metabole Ziekten aanwezig zijn. Een volledig ingevuld aanvraagformulier moet worden meegestuurd met het patiëntenmateriaal.
- Doorlooptijd: 3 weken.
Gekweekte huidfibroblasten
- Bewaren/verzenden: Kamertemperatuur.
- Instructie: Laat de fibroblasten groeien tot ~80% confluentie in een T-25 kweekfles. Vul voor versturing het kweekflesje volledig met steriel gebufferd (m.b.v. 25 mM Hepes) kweekmedium (bv. HAM of DMEM) aangevuld met 10% serum en 1% penicilline-streptomycine. Sluit het kweekflesje goed en omwikkel de dop met parafilm. Label de kweekfles eenduidig met naam van de patiënt en geboortedatum. Verpak het flesje in beschermend materiaal en verstuur de fibroblasten bij kamertemperatuur. Het materiaal moet binnen 48 uur aankomen op het laboratorium Genetische Metabole Ziekten. Een volledig ingevuld aanvraagformulier moet worden meegestuurd met het patiëntenmateriaal.
Wanneer het niet mogelijk is fibroblasten in kweek te versturen, kan een huidbiopt in steriel gebuffered (m.b.v. 25 mM Hepes) kweekmedium (bv. HAM of DMEM) zonder toevoeging van serum of antibiotica worden verstuurd bij kamertemperatuur.
Voor interne aanvragers:
Bioptmedium kan worden afgehaald bij de balie van het laboratorium Genetische Metabole Ziekten (F0-132). - Doorlooptijd: 3 maanden.
Kort-keten 3-hydroxy-acyl-CoA dehydrogenase (SCHAD)
Aandoening
SCHAD deficiëntie.
Omschrijving
Kort keten 3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase (SCHAD) katalyseert de derde reactie van de mitochondriale beta-oxidatie van kort-keten vetzuren.
OMIM
Methode
Spectrofotometrie
Materialen:
EDTA volbloed
- Onderzoeksmateriaal: Perifere bloed mononucleaire cellen geïsoleerd uit volbloed.
- Bewaren/verzenden: Kamertemperatuur.
- Instructie: Ten minste 4.5 ml EDTA volbloed verstuurd op kamertemperatuur. Buisjes moeten eenduidig gelabeld zijn met naam van de patiënt en geboortedatum, goed gesloten en in beschermend materiaal verstuurd worden. Het materiaal moet binnen 24 uur na afname op het laboratorium Genetische Metabole Ziekten aanwezig zijn. Een volledig ingevuld aanvraagformulier moet worden meegestuurd met het patiëntenmateriaal.
- Doorlooptijd: 3 weken.
Gekweekte huidfibroblasten
- Bewaren/verzenden: Kamertemperatuur.
- Instructie: Laat de fibroblasten groeien tot ~80% confluentie in een T-25 kweekfles. Vul voor versturing het kweekflesje volledig met steriel gebufferd (m.b.v. 25 mM Hepes) kweekmedium (bv. HAM of DMEM) aangevuld met 10% serum en 1% penicilline-streptomycine. Sluit het kweekflesje goed en omwikkel de dop met parafilm. Label de kweekfles eenduidig met naam van de patiënt en geboortedatum. Verpak het flesje in beschermend materiaal en verstuur de fibroblasten bij kamertemperatuur. Het materiaal moet binnen 48 uur aankomen op het laboratorium Genetische Metabole Ziekten. Een volledig ingevuld aanvraagformulier moet worden meegestuurd met het patiëntenmateriaal.
Wanneer het niet mogelijk is fibroblasten in kweek te versturen, kan een huidbiopt in steriel gebuffered (m.b.v. 25 mM Hepes) kweekmedium (bv. HAM of DMEM) zonder toevoeging van serum of antibiotica worden verstuurd bij kamertemperatuur.
Voor interne aanvragers:
Bioptmedium kan worden afgehaald bij de balie van het laboratorium Genetische Metabole Ziekten (F0-132). - Doorlooptijd: 3 maanden.
Kort-keten acyl-CoA dehydrogenase (SCAD)
Aandoening
SCHAD deficiëntie.
Omschrijving
Kort-keten acyl-CoA dehydrogenase (SCAD) katalyseert de eerste reactie van de mitochondriale beta-oxidatie van kort-keten vetzuren.
OMIM
Methode
UPLC-UV
Materialen:
EDTA volbloed
- Onderzoeksmateriaal: Perifere bloed mononucleaire cellen geïsoleerd uit volbloed.
- Bewaren/verzenden: Kamertemperatuur.
- Instructie: Ten minste 4.5 ml EDTA volbloed verstuurd op kamertemperatuur. Buisjes moeten eenduidig gelabeld zijn met naam van de patiënt en geboortedatum, goed gesloten en in beschermend materiaal verstuurd worden. Het materiaal moet binnen 24 uur na afname op het laboratorium Genetische Metabole Ziekten aanwezig zijn. Een volledig ingevuld aanvraagformulier moet worden meegestuurd met het patiëntenmateriaal.
- Doorlooptijd: 3 weken.
Gekweekte huidfibroblasten
- Bewaren/verzenden: Kamertemperatuur.
- Instructie: Laat de fibroblasten groeien tot ~80% confluentie in een T-25 kweekfles. Vul voor versturing het kweekflesje volledig met steriel gebufferd (m.b.v. 25 mM Hepes) kweekmedium (bv. HAM of DMEM) aangevuld met 10% serum en 1% penicilline-streptomycine. Sluit het kweekflesje goed en omwikkel de dop met parafilm. Label de kweekfles eenduidig met naam van de patiënt en geboortedatum. Verpak het flesje in beschermend materiaal en verstuur de fibroblasten bij kamertemperatuur. Het materiaal moet binnen 48 uur aankomen op het laboratorium Genetische Metabole Ziekten. Een volledig ingevuld aanvraagformulier moet worden meegestuurd met het patiëntenmateriaal.
Wanneer het niet mogelijk is fibroblasten in kweek te versturen, kan een huidbiopt in steriel gebuffered (m.b.v. 25 mM Hepes) kweekmedium (bv. HAM of DMEM) zonder toevoeging van serum of antibiotica worden verstuurd bij kamertemperatuur.
Voor interne aanvragers:
Bioptmedium kan worden afgehaald bij de balie van het laboratorium Genetische Metabole Ziekten (F0-132). - Doorlooptijd: 3 maanden.
Lang-keten 3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase (LCHAD) deficiëntie
Aandoening
- Lang-keten 3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase (LCHAD) deficiëntie.
- Lang-keten 3-ketothiolase (LCKAT) deficiëntie.
- Mitochondrial trifunctional protein (MTP) deficiëntie.
Omschrijving
Lang-keten 3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase (LCHAD) en lang-keten 3-ketothiolase (LCKAT) zijn onderdeel van het mitochondriaal trifunctioneel eiwitcomplex (MTP) en katalyseren respectievelijk de derde en vierde stap van de mitochondriale beta-oxidatie van lang-keten vetzuren. Zowel de LCHAD en de LCKAT activiteit moeten gemeten worden om een LCHAD/LCKAT/MTP deficiëntie vast te kunnen stellen.
OMIM
Methode
UPLC-UV
Materialen:
EDTA volbloed
- Onderzoeksmateriaal: Perifere bloed mononucleaire cellen geïsoleerd uit volbloed.
- Bewaren/verzenden: Kamertemperatuur.
- Instructie: Ten minste 7-10 ml EDTA volbloed verstuurd op kamertemperatuur. Buisjes moeten eenduidig gelabeld zijn met naam van de patiënt en geboortedatum, goed gesloten en in beschermend materiaal verstuurd worden. Het materiaal moet binnen 24 uur na afname op het laboratorium Genetische Metabole Ziekten aanwezig zijn. Een volledig ingevuld aanvraagformulier moet worden meegestuurd met het patiëntenmateriaal.
- Doorlooptijd: 3 weken.
Gekweekte huidfibroblasten
- Bewaren/verzenden: Kamertemperatuur.
- Instructie: Laat de fibroblasten groeien tot ~80% confluentie in een T-25 kweekfles. Vul voor versturing het kweekflesje volledig met steriel gebufferd (m.b.v. 25 mM Hepes) kweekmedium (bv. HAM of DMEM) aangevuld met 10% serum en 1% penicilline-streptomycine. Sluit het kweekflesje goed en omwikkel de dop met parafilm. Label de kweekfles eenduidig met naam van de patiënt en geboortedatum. Verpak het flesje in beschermend materiaal en verstuur de fibroblasten bij kamertemperatuur. Het materiaal moet binnen 48 uur aankomen op het laboratorium Genetische Metabole Ziekten. Een volledig ingevuld aanvraagformulier moet worden meegestuurd met het patiëntenmateriaal.
Wanneer het niet mogelijk is fibroblasten in kweek te versturen, kan een huidbiopt in steriel gebuffered (m.b.v. 25 mM Hepes) kweekmedium (bv. HAM of DMEM) zonder toevoeging van serum of antibiotica worden verstuurd bij kamertemperatuur.
Voor interne aanvragers:
Bioptmedium kan worden afgehaald bij de balie van het laboratorium Genetische Metabole Ziekten (F0-132). - Doorlooptijd: 3 maanden.
Midden-lang keten acyl-CoA dehydrogenase (MCAD)
Aandoening
MCAD deficiëntie.
Omschrijving
Midden-keten acyl-CoA dehydrogenase is het eerste enzym van het mitochondriale beta-oxidatiesysteem voor midden-keten vetzuren.
OMIM
Methode
UPLC-UV
Materialen:
EDTA volbloed
- Onderzoeksmateriaal: perifere bloed mononucleaire cellen geïsoleerd uit volbloed.
- Bewaren/verzenden: kamertemperatuur.
- Instructie: ten minste 4.5 ml EDTA volbloed verstuurd op kamertemperatuur. Buisjes moeten eenduidig gelabeld zijn met naam van de patiënt en geboortedatum, goed gesloten en in beschermend materiaal verstuurd worden. Het materiaal moet binnen 24 uur na afname op het laboratorium Genetische Metabole Ziekten aanwezig zijn. Een volledig ingevuld aanvraagformulier moet worden meegestuurd met het patiëntenmateriaal.
- Doorlooptijd: 3 weken.
Gekweekte huidfibroblasten
- Bewaren/verzenden: kamertemperatuur.
- Instructie: laat de fibroblasten groeien tot ~80% confluentie in een T-25 kweekfles. Vul voor versturing het kweekflesje volledig met steriel gebufferd (m.b.v. 25 mM Hepes) kweekmedium (bv. HAM of DMEM) aangevuld met 10% serum en 1% penicilline-streptomycine. Sluit het kweekflesje goed en omwikkel de dop met parafilm. Label de kweekfles eenduidig met naam van de patiënt en geboortedatum. Verpak het flesje in beschermend materiaal en verstuur de fibroblasten bij kamertemperatuur. Het materiaal moet binnen 48 uur aankomen op het laboratorium Genetische Metabole Ziekten. Een volledig ingevuld aanvraagformulier moet worden meegestuurd met het patiëntenmateriaal.
Wanneer het niet mogelijk is fibroblasten in kweek te versturen, kan een huidbiopt in steriel gebuffered (m.b.v. 25 mM Hepes) kweekmedium (bv. HAM of DMEM) zonder toevoeging van serum of antibiotica worden verstuurd bij kamertemperatuur.
Voor interne aanvragers:
bioptmedium kan worden afgehaald bij de balie van het laboratorium Genetische Metabole Ziekten (F0-132). - Doorlooptijd: 3 maanden.
Myristaat β-oxidatie (flux assay)
Omschrijving
De myristaat beta-oxidatie activiteit wordt gemeten met tritium-gelabeld myristaat en is een maat voor de flux door het mitochondriale beta-oxidatie systeem. De test kan worden uitgevoerd om te onderzoeken of een patiënt lijdt aan een defect in de mitochondriale midden-keten vetzuuroxidatie (e.g. MCADD of MADD). Bij een verlaagde myristaat beta-oxidatie activiteit is aanvullend onderzoek nodig om het defect te identificeren (bv. palmitaatbelastingtest, enzymactiviteits meting of moleculaire analyse). De test kan ook worden uitgevoerd bij patiënten waarvan reeds bekend is dat zij een mitochondriaal vetzuuroxidatie defect hebben om de flux door het mitochondriale beta-oxidatie systeem te meten. De uitslag kan in dit geval gebruikt worden voor het instellen van mogelijke therapie.
Methode
Radiochemie
Materialen:
Gekweekte huidfibroblasten
- Bewaren/verzenden: kamertemperatuur.
- Instructie: laat de fibroblasten groeien tot ~80% confluentie in een T-25 kweekfles. Vul voor versturing het kweekflesje volledig met steriel gebufferd (m.b.v. 25 mM Hepes) kweekmedium (bv. HAM of DMEM) aangevuld met 10% serum en 1% penicilline-streptomycine. Sluit het kweekflesje goed en omwikkel de dop met parafilm. Label de kweekfles eenduidig met naam van de patiënt en geboortedatum. Verpak het flesje in beschermend materiaal en verstuur de fibroblasten bij kamertemperatuur. Het materiaal moet binnen 48 uur aankomen op het laboratorium Genetische Metabole Ziekten. Een volledig ingevuld aanvraagformulier moet worden meegestuurd met het patiëntenmateriaal.
Wanneer het niet mogelijk is fibroblasten in kweek te versturen, kan een huidbiopt in steriel gebuffered (m.b.v. 25 mM Hepes) kweekmedium (bv. HAM of DMEM) zonder toevoeging van serum of antibiotica worden verstuurd bij kamertemperatuur.
Voor interne aanvragers:
Bioptmedium kan worden afgehaald bij de balie van het laboratorium Genetische Metabole Ziekten (F0-132). - Doorlooptijd: 3 maanden.
Oleaat β-oxidatie (flux assay)
Omschrijving
De oleaat beta-oxidatie activiteit wordt gemeten met tritium-gelabeld oleaat en is een maat voor de flux door het mitochondriale beta-oxidatie systeem. De test kan worden uitgevoerd om te onderzoeken of een patiënt lijdt aan een defect in de mitochondriale lang-keten vetzuuroxidatie. Bij een verlaagde oleaat beta-oxidatie activiteit is aanvullend onderzoek nodig om het defect te identificeren (bv. palmitaatbelastingtest, enzymactiviteits meting of moleculaire analyse). De test kan ook worden uitgevoerd bij patiënten waarvan reeds bekend is dat zij een mitochondriaal vetzuuroxidatie defect hebben om de flux door het mitochondriale beta-oxidatie systeem te meten. De uitslag kan in dit geval gebruikt worden voor het instellen van mogelijke therapie.
Methode
Radiochemie
Materialen:
Gekweekte huidfibroblasten
- Bewaren/verzenden: kamertemperatuur.
- Instructie: laat de fibroblasten groeien tot ~80% confluentie in een T-25 kweekfles. Vul voor versturing het kweekflesje volledig met steriel gebufferd (m.b.v. 25 mM Hepes) kweekmedium (bv. HAM of DMEM) aangevuld met 10% serum en 1% penicilline-streptomycine. Sluit het kweekflesje goed en omwikkel de dop met parafilm. Label de kweekfles eenduidig met naam van de patiënt en geboortedatum. Verpak het flesje in beschermend materiaal en verstuur de fibroblasten bij kamertemperatuur. Het materiaal moet binnen 48 uur aankomen op het laboratorium Genetische Metabole Ziekten. Een volledig ingevuld aanvraagformulier moet worden meegestuurd met het patiëntenmateriaal.
Wanneer het niet mogelijk is fibroblasten in kweek te versturen, kan een huidbiopt in steriel gebuffered (m.b.v. 25 mM Hepes) kweekmedium (bv. HAM of DMEM) zonder toevoeging van serum of antibiotica worden verstuurd bij kamertemperatuur.
Voor interne aanvragers:
Bioptmedium kan worden afgehaald bij de balie van het laboratorium Genetische Metabole Ziekten (F0-132). - Doorlooptijd: 3 maanden.
Plasmamembraan carnitinetransporter (OCTN2)
Aandoening
Primaire/systemische carnitine deficiëntie.
Omschrijving
OCTN2 is de natrium afhankelijk carnitinetransporter in het plasmamembraan en is deficiënt in primaire (systemische) carnitine deficiëntie. OCTN2 activiteit wordt gemeten met radioactief gelabeld carnitine in gekweekte huidfibroblasten.
OMIM
Methode
MS/MS
Materialen:
Gekweekte huidfibroblasten
- Bewaren/verzenden: kamertemperatuur.
- Instructie: laat de fibroblasten groeien tot ~80% confluentie in een T-25 kweekfles. Vul voor versturing het kweekflesje volledig met steriel gebufferd (m.b.v. 25 mM Hepes) kweekmedium (bv. HAM of DMEM) aangevuld met 10% serum en 1% penicilline-streptomycine. Sluit het kweekflesje goed en omwikkel de dop met parafilm. Label de kweekfles eenduidig met naam van de patiënt en geboortedatum. Verpak het flesje in beschermend materiaal en verstuur de fibroblasten bij kamertemperatuur. Het materiaal moet binnen 48 uur aankomen op het laboratorium Genetische Metabole Ziekten. Een volledig ingevuld aanvraagformulier moet worden meegestuurd met het patiëntenmateriaal.
Wanneer het niet mogelijk is fibroblasten in kweek te versturen, kan een huidbiopt in steriel gebuffered (m.b.v. 25 mM Hepes) kweekmedium (bv. HAM of DMEM) zonder toevoeging van serum of antibiotica worden verstuurd bij kamertemperatuur.
Voor interne aanvragers:
Bioptmedium kan worden afgehaald bij de balie van het laboratorium Genetische Metabole Ziekten (F0-132). - Doorlooptijd: 3 maanden.
Zeer lang-keten acyl-CoA dehydrogenase (VLCAD)
Aandoening
VLCAD deficiëntie.
Omschrijving
Zeer lang-keten acyl-CoA dehydrogenase (VLCAD) katalyseert de eerste stap van de mitochondriale beta-oxidatie van lang-keten vetzuren.
OMIM
Methode
UPLC-UV
Materialen:
EDTA volbloed
- Onderzoeksmateriaal: perifere bloed mononucleaire cellen geïsoleerd uit volbloed.
- Bewaren/verzenden: kamertemperatuur.
- Instructie: ten minste 4.5 ml EDTA volbloed verstuurd op kamertemperatuur. Buisjes moeten eenduidig gelabeld zijn met naam van de patiënt en geboortedatum, goed gesloten en in beschermend materiaal verstuurd worden. Het materiaal moet binnen 24 uur na afname op het laboratorium Genetische Metabole Ziekten aanwezig zijn. Een volledig ingevuld aanvraagformulier moet worden meegestuurd met het patiëntenmateriaal.
- Doorlooptijd: 3 weken.
Gekweekte huidfibroblasten
- Bewaren/verzenden: kamertemperatuur.
- Instructie: laat de fibroblasten groeien tot ~80% confluentie in een T-25 kweekfles. Vul voor versturing het kweekflesje volledig met steriel gebufferd (m.b.v. 25 mM Hepes) kweekmedium (bv. HAM of DMEM) aangevuld met 10% serum en 1% penicilline-streptomycine. Sluit het kweekflesje goed en omwikkel de dop met parafilm. Label de kweekfles eenduidig met naam van de patiënt en geboortedatum. Verpak het flesje in beschermend materiaal en verstuur de fibroblasten bij kamertemperatuur. Het materiaal moet binnen 48 uur aankomen op het laboratorium Genetische Metabole Ziekten. Een volledig ingevuld aanvraagformulier moet worden meegestuurd met het patiëntenmateriaal.
Wanneer het niet mogelijk is fibroblasten in kweek te versturen, kan een huidbiopt in steriel gebuffered (m.b.v. 25 mM Hepes) kweekmedium (bv. HAM of DMEM) zonder toevoeging van serum of antibiotica worden verstuurd bij kamertemperatuur.
Voor interne aanvragers:
Bioptmedium kan worden afgehaald bij de balie van het laboratorium Genetische Metabole Ziekten (F0-132). - Doorlooptijd: 3 maanden.